Metabolizm obwodowej insuliny, proinsuliny i peptydu C u ciężarnych szczurów.

Aby wyjaśnić zmiany w metabolizmie węglowodanów, które zachodzą w czasie ciąży, zmierzono tempo metabolizmu insuliny, proinsuliny i peptydu C pod względem metabolizmu, stosując stałą technikę infuzji u szczurów ciężarnych iu dziewiczych współmieszkańców. Ponadto, przepuszczalność łożyska względem tych peptydów oceniano przez równoczesne określenie ich stężenia we krwi płodowej, płynie owodniowym i krwi tętniczej matki, a nerkową ekstrakcję i wydalanie insuliny i peptydu C określono podczas jednoczesnych badań hemodynamiki nerkowej. Współczynnik metabolizmu (MCR) insuliny był wyższy (p <0,005) u ciężarnych zwierząt (61,5 . 1,7 ml / min na kg masy ciała) w porównaniu z niemowlętami z pierwszego tłoczenia (51,5 +/- 2,2 ml / min na kg ). Zniknięcie insuliny z krążenia zarówno po pojedynczym wstrzyknięciu, jak i przerwaniu ciągłego wlewu było również szybsze u zwierząt ciężkich. Read more „Metabolizm obwodowej insuliny, proinsuliny i peptydu C u ciężarnych szczurów.”

Hemodynamiczna i adrenergiczna kontrola przerostu prawej komory serca.

Celem tego badania było ustalenie, czy przerost mięśnia sercowego w odpowiedzi na przeciążenie hemodynamiczne jest pierwotnym rezultatem zwiększonego obciążenia, czy też jest wtórnym wynikiem takich innych czynników, jak współistniejąca aktywacja współczulna. Aby dokonać tego rozróżnienia, przeprowadzono cztery eksperymenty; główny wynik eksperymentalny, przerost mięśnia sercowego, oceniono pod względem masy komorowej i pola przekroju kardiocytów. W pierwszym doświadczeniu komora prawej komory była obciążona różnicowo przez przeciążenie komory komorowej, podczas rozładowywania składowego mięśnia brodawkowatego; Model ten był używany do pytania, czy jakakolwiek substancja endogenna lub egzogenna powodowała jednorodny przerost, lub czy lokalnie odpowiednia reakcja na obciążenie spowodowała przerost komór z zanikiem mięśni brodawkowatych. Ten ostatni wynik uzyskano, zarówno gdy każdy aspekt obciążenia różnicowego był równoczesny, jak i gdy uprzednio przerośnięty mięsień brodawkowaty został rozładowany w ciśnieniowej przeciążonej prawej komorze. W drugim doświadczeniu wykorzystano odnerwienie nasierdziowe, a następnie przeciążenie ciśnieniowe, aby ocenić rolę miejscowych neurogennych katecholamin w genezie hipertrofii. Read more „Hemodynamiczna i adrenergiczna kontrola przerostu prawej komory serca.”

Wpływ infuzji wody na hemodynamikę nerkową i rekonsorpcję rurkową sodu

Zestresowane psy otrzymujące infuzję chlorotiazydu i kwasu etakrynowego otrzymały 600 ml infuzji wody destylowanej lub rozcieńczonych roztworów dekstrozy. Bezwzględna szybkość reabsorpcji w kanalikach sodowych uległa zmniejszeniu, a szybkość filtracji kłębuszkowej zwiększała się podczas obciążenia wodą, pomimo towarzyszącego zmniejszenia stężenia sodu w osoczu i spadku filtrowanego ładunku sodu. Stopień, w jakim zmniejszona reabsorpcja sodu zmniejszyła się, a wydalanie sodu wzrosło, była odwrotnie proporcjonalna do stopnia, w jakim filtrowany ładunek sodu został obniżony w wyniku zmniejszenia stężenia sodu w osoczu. Wnioskujemy, że w obecności diuretycznej blokady dystalnej reularnej absorpcji sodu, infuzja wody obniża proksymalną wchłanianie zwrotne sodu i że zmiany te są jakościowo podobne do obserwowanych poprzednio podczas wlewu soli fizjologicznej. Podobna depresja reabsorpcji sodu w kanalikach i zwiększona wydalanie sodu wystąpiła podczas obciążania wodą przy braku diuretyków u psów poddawanych diurezie solnej, która prawdopodobnie zapewniała wysoką szybkość dystalnej reabsorpcji sodu przed obciążeniem wodą. Read more „Wpływ infuzji wody na hemodynamikę nerkową i rekonsorpcję rurkową sodu”

Selektywna ekspresja nadaktywności syntetazy fosforoibosilofosforanowej w ludzkich liniach limfoblastycznych.

Fenotypową ekspresję superpochodności syntetazy 1-pirofosforanu 5-fosfibibozylu (PRPP) badano w liniach limfoblastów pochodzących od sześciu niepowiązanych pacjentów płci męskiej. Fibroblasty tych osobników mają zwiększone tempo syntezy PRPP i nukleotydu purynowego i wyrażają cztery klasy zaburzeń kinetycznych leżących u podstaw superwatywności enzymów: zwiększoną maksymalną prędkość reakcji (katalityczny defekt); oporność na inhibitor (defekt regulacyjny); zwiększone powinowactwo substratu (wada wiązania substratu); oraz połączone wady katalityczne i regulacyjne. Linie limfoblastów od trzech pacjentów z defektami katalitycznymi i od trzech zdrowych osób były nieodróżnialne pod względem aktywności enzymów, stężeń i generacji PRPP oraz tempa syntezy puryn. Enzym w limfoblastach od pacjenta z połączonymi defektami wykazywał również normalną maksymalną prędkość reakcji, ale wyrażał oporność na inhibitor nukleotydu purynowego. Drugi defekt regulacyjny i defekt wiązania substratu były również widoczne w limfoblastach i były identyczne z defektami enzymu w fibroblastach od odpowiednich pacjentów. Read more „Selektywna ekspresja nadaktywności syntetazy fosforoibosilofosforanowej w ludzkich liniach limfoblastycznych.”

Związek między powierzchnią, objętością i grubością kości biodowej biodrowej w starzeniu i osteoporozie. Implikacje dla mikroanatomicznych i komórkowych mechanizmów utraty kości.

Opracowaliśmy nową metodę badania zmian strukturalnych zachodzących w kości beleczkowej w procesie starzenia i osteoporozy. Przy równoczesnym pomiarze całkowitego obwodu i powierzchni kości w cienkich przekrojach można uzyskać pośrednie wskaźniki średniej grubości beleczki (MTPT) i średniej gęstości beleczki płytkowej (MTPD), tak aby objętość kości beleczkowej = MTPD X MTPT. MTPD jest wskaźnikiem prawdopodobieństwa, że linia skanująca lub testowa będzie przecinać element strukturalny kości i jest odwrotnością średniej odległości między punktami środkowymi elementów strukturalnych, pomnożonej przez pi / 2. Zastosowaliśmy tę metodę do pobrania kości z 78 zdrowych osób, 100 pacjentów ze złamaniem kręgosłupa i 50 pacjentów ze złamaniem biodra. Zmniejszenie objętości kości beleczkowej obserwowane u osób zdrowych z wiekiem było głównie spowodowane zmniejszeniem gęstości płytki, bez znaczącego zmniejszenia grubości płytki. Read more „Związek między powierzchnią, objętością i grubością kości biodowej biodrowej w starzeniu i osteoporozie. Implikacje dla mikroanatomicznych i komórkowych mechanizmów utraty kości.”

Białko 39-kD hamuje tkankowy klirens aktywatora plazminogenu in vivo.

Tkankowy aktywator plazminogenu (t-PA) jest proteazą serynową w osoczu, który katalizuje początkowy i ograniczający szybkość etap w kaskadzie fibrynolitycznej. t-PA jest szeroko stosowany jako środek trombolityczny w leczeniu ostrego zawału mięśnia sercowego. Jednak jego stosowanie zostało osłabione przez jego szybki klirens wątrobowy z krążenia po podaniu dożylnym. Badania zarówno z komórkami raka wątrobowokomórkowego szczura MH1C1 (G. Bu, S. Read more „Białko 39-kD hamuje tkankowy klirens aktywatora plazminogenu in vivo.”

Modulacja insulinopodobnego czynnika wzrostu I wiążącego się z hodowlami jednowarstwowych ludzkich fibroblastów przez białka nośnikowe insulinopodobnego czynnika wzrostu uwalniane do pożywki inkubacyjnej.

Względny udział receptorów insulinopodobnego czynnika wzrostu (IGF) typu I i typu II oraz białek nośnikowych IGF w wiązaniu znacznika IGF-I do hodowanych ludzkich fibroblastów określono w konkurencyjnych eksperymentach wiązania, w których stosowano nieznakowaną insulinę i syntetyczną hybrydę insuliny IGF-I. cząsteczki zawierające łańcuch A insuliny i domenę B IGF-I. Podczas gdy insulina wiąże się tylko z receptorami IGF typu I, hybrydy B-IGF-I wiążą się z receptorami typu I i białkami nośnymi IGF, ale nie z receptorami typu II. W zawieszonych ludzkich fibroblastach znacznik IGF-I wiąże się głównie z receptorami typu I IGF (hamowanie przez IGF-I znacznie większe niż insulina większe niż cząsteczki hybrydowe B-IGF-I). Przeciwnie, w monowarstwach fibroblastów wiązanie IGF-I było minimalnie hamowane przez insulinę lub cząsteczki hybrydowe, co sugeruje dominujące wiązanie z receptorem IGF typu II. Read more „Modulacja insulinopodobnego czynnika wzrostu I wiążącego się z hodowlami jednowarstwowych ludzkich fibroblastów przez białka nośnikowe insulinopodobnego czynnika wzrostu uwalniane do pożywki inkubacyjnej.”

Skurcz hodowanych komórek kłębuszkowych szczurów o pozornym pochodzeniu mezangialnym po stymulacji angiotensyną II i wazopresyną argininową

Badania mające na celu określenie fizjologicznej roli kłębuszkowych komórek mezangialnych zostały przeprowadzone przy użyciu homogennych hodowli szczurzych komórek kłębuszkowych o widocznym pochodzeniu mezangialnym (MS). Hodowane komórki MS leczono wazopresyną argininową (AVP), angiotensyną II (AGII), prostaglandyną E2 i parathormonem. AVP (0,1 nM) i AGII (1 nM) stymulowały skurcz komórek MS in vitro, który był zakończony przez 2 min w 37 ° C lub 10 min w 23 ° C, jak zaobserwowano przez kontrast fazowy i mikroskopię elektronową. Relaks powtórzył się 15 minut po dodaniu hormonów w 23 ° C. Podobne eksperymenty w klonowanych komórkach nabłonka kłębuszku szczura lub komórkach wytwarzających .-reninę nie wykazywały odpowiedzi skurczowej. Read more „Skurcz hodowanych komórek kłębuszkowych szczurów o pozornym pochodzeniu mezangialnym po stymulacji angiotensyną II i wazopresyną argininową”

Wyraźny szlak mysich makrofagów dla ludzkich lipoprotein bogatych w triglicerydy.

Makrofagi mysiego P388D1 mają szlak receptorowy, który wiąże się z ludzkimi hipertriglicerydemicznymi lipoproteinami o bardzo niskiej gęstości (HTG-VLDL), które zasadniczo różnią się od szlaku receptora LDL. Traktowane trypsyną HTG-VLDL (tryp-VLDL), pozbawione apolipoproteiny (apo) -E, nie wiążą się z receptorem LDL, jednak tryp-VLDL i HTG-VLDL krzyżują się w rywalizacji o wiązanie z receptorami makrofagowymi P388D1, wskazując, że te lipoproteiny wiążą się z tymi samymi miejscami. Swoiste wiązanie tryp-VLDL i HTG-VLDL o wysokim powinowactwie z makrofagami w temperaturze 4 ° C jest równoważne i w temperaturze 37 ° C oba wytwarzają szybką, masywną, krzywoliniową (zależną od receptorów) akumulację triglicerydów w makrofagach. Bloty ligandów pokazują, że makrofagi P388D1 eksprymują białko błonowe o około 190 kD (MBP190), które wiąże zarówno tryp-VLDL, jak i HTG-VLDL; to wiązanie konkuruje z HTG-VLDL, trypsynizowaną HTG-VLDL i trypsynowaną normalną VLDL, ale nie przez normalny VLDL lub LDL. Receptor LDL makrofagów (około 130 kD) i wychwyt komórkowy beta-VLDL, ale nie MBP 190, ani wychwyt tryp-VLDL, nie są indukowane, gdy komórki są eksponowane na pożywkę pozbawioną lipoprotein i zmniejszają się, gdy komórki są obciążone cholesterolem. Read more „Wyraźny szlak mysich makrofagów dla ludzkich lipoprotein bogatych w triglicerydy.”

Zwiększona ekspresja transformującego czynnika wzrostu beta i proteoglikanów w doświadczalnym kłębuszkowym zapaleniu nerek. Możliwa rola w ekspansji mezangialnej macierzy pozakomórkowej.

Kumulacja kłębuszkowa zewnątrzkomórkowej macierzy jest główną cechą postępującego zapalenia kłębuszków nerkowych. Wcześniej wykazaliśmy, że transformujący czynnik wzrostu beta (TGF-beta) jest unikalny wśród czynników wzrostu regulujących produkcję proteoglikanów biglycan i dekorin przez kłębuszkowe komórki mezangialne in vitro. Dostarczamy obecnie dowodów na podwyższoną ekspresję TGF-beta, proteoglikanów i fibronektyny w kłębuszkowym zapaleniu nerek indukowaną u szczurów przez wstrzyknięcie surowicy anty-tymocytowej (ATS). Glomeruli hodowano z nerki szczurzy po 1, 4, 7, 14 i 28 dniach po podaniu ATS. Zwiększoną syntezę proteoglikanów wykrywano począwszy od 4 dnia, który osiągnął szczyt przy wzroście o 4,900% w porównaniu z kontrolą w dniu 7, i powrócił do poziomów kontrolnych do dnia 28. Read more „Zwiększona ekspresja transformującego czynnika wzrostu beta i proteoglikanów w doświadczalnym kłębuszkowym zapaleniu nerek. Możliwa rola w ekspansji mezangialnej macierzy pozakomórkowej.”