Aktywacja peptydem chemotaktycznym ludzkich neutrofili i komórek HL-60. Toksynę krztuścową ujawnia korelację między wytwarzaniem trisfosforanu inozytolu, przejściami jonów wapnia i aktywacją komórkową.

Mechanizm aktywacji neutrofili przez peptyd chemotaktyczny formyl-metionyl-leucylo-fenyloalaninę (FMLP) badano przez wstępne traktowanie ludzkich neutrofili toksyną krztuśca. Po stymulacji FMLP, stężenie wapnia wolnego od cytozolów, [Ca2 +] i, zwiększa się zarówno przez stymulację dopływu wapnia, jak i mobilizację wapnia komórkowego. Mierzono [Ca2 +] i, jak również wytwarzanie produktu rozpadu fosfolipidów, trisfosforanu inozytolu (IP3), który, jak się uważa, pośredniczy w mobilizacji Ca2 +. Jako że pula fosfoinozytolitu w ludzkich neutrofilach jest trudna do wstępnego znakowania [3H] mioinozytolem, eksperymenty przeprowadzono również w hodowli komórkowej ludzkiej białaczki promielocytowej HL-60 po różnicowaniu z dimetylosulfotlenkiem. Wstępne traktowanie toksyny krztuścowej obu typów komórek hamowało stymulowaną przez FMLP depolaryzację błony, egzocytozę i produkcję ponadtlenku w sposób zależny od dawki. Ten efekt toksyny był selektywny dla agonisty receptora, ponieważ stymulacja tych parametrów przez dwie substancje omijające mechanizm transdukcji, jonofor jonomycynę i octan forbolu mirystynianu forbolu były niezmienione. Wzrosty w [Ca2 +] i, a także generowanie IP3 w odpowiedzi na FMLP, zostały zahamowane równolegle; w celu zahamowania czynnościowych reakcji wymagane były nieco niższe stężenia toksyn. Wzmocnienie [Ca2 +] i było bardziej wyraźne przy braku pozakomórkowego wapnia, tj. Gdy wzrost jest spowodowany jedynie mobilizacją wapnia. Wyniki dostarczają dowodów, że stymulacja fosfolipazą C przez FMLP prowadząca do generacji IP3 jest zaangażowana w mechanizm transdukcji sygnału. Sprzężenie zajęcia receptora FMLP z aktywacją fosfolipazy C jest wrażliwe na toksynę krztuścową, co sugeruje zaangażowanie białka wiążącego GTP (białka N), które, jak wykazano, jest substratem toksyny krztuśca. Równoległe zmiany [Ca2 +] i i IP3 dodatkowo potwierdzają hipotezę, że IP3 jest mediatorem mobilizacji wapnia w komórkach aktywowanych FMLP.
[hasła pokrewne: przerost trzeciego migdałka, ćwiczenia na spostrzegawczość, in vitro z kd ]
[hasła pokrewne: in vitro z kd, jadłospis dla cukrzyka typu 2, farba magnetyczna flugger ]