Matryce pozakomórkowe macierzy zewnątrzkomórkowej usprawniają przenoszenie genów do ludzkich komórek krwiotwórczych za pomocą wektorów retrowirusowych.

Wykazano, że bezpośredni kontakt między komórkami krwiotwórczymi a liniami komórek pakujących wirusy lub innymi źródłami zrębu zwiększa efektywność przenoszenia genu za pośrednictwem retrowirusów do tych docelowych komórek w porównaniu z zakażeniem supernatantem wirusowym. Zbadaliśmy rolę określonych molekuł macierzy pozakomórkowej szpiku kostnego (ECM) w tym zjawisku. W niniejszym raporcie stwierdziliśmy, że zakażenie komórek przylegających do karboksykońcowego fragmentu 30/35-kD cząsteczki fibronektyny (30/35 FN), która zawiera alternatywną domenę adhezyjną komórek CS-1, znacznie zwiększa przenoszenie genów do komórek krwiotwórczych. Zastosowano dwa wektory retrowirusowe różniące się rekombinowanym miano wirusa. Przeniesienie genu do zatwierdzonych komórek progenitorowych i długoterminowych komórek inicjujących wzrost kultur, test in vitro na ludzkie komórki macierzyste, znacznie wzrosło, gdy komórki zostały zakażone przylegając do płytek opłaszczonych FN 30/35 w porównaniu z komórkami zakażonymi na pokryciu BSA kontrolne płytki lub płytki pokryte innymi cząsteczkami ECM szpiku kostnego. Chociaż transfer genów do zatwierdzonych komórek progenitorowych oraz w mniejszym stopniu do komórek inicjujących wzrost komórek był zwiększony również na nietkniętej fibronektynie, zwiększona wydajność przenoszenia genu do komórek krwiotwórczych na 30/35 FN była zależna od sekwencji CS-1, ponieważ infekcja na podobny fragment FN pozbawiony CS-1 (42 FN) był suboptymalny. 30/35 FN zostało wcześniej wykazane przez nasze laboratorium i innych badaczy do pośredniczenia w przyleganiu prymitywnych mysich i ludzkich hematopoetycznych komórek macierzystych do mikrośrodowiska krwiotwórczego. Dodatkowe badania wykazały, że ani rozpuszczalny 30/35 FN, ani niespecyficzne wiązanie komórek krwiotwórczych z płytkami opłaszczonymi poli-L-lizyną miało jakikolwiek zauważalny wpływ na skuteczność zakażania tych komórek. Nasze wyniki wskazują, że hematopoetyczna adhezja komórek macierzystych do specyficznych cząsteczek ECM wpływa na skuteczność infekcji retrowirusowych. Odkrycia te powinny pomóc w projektowaniu protokołów transferu genów z wykorzystaniem krwiotwórczych komórek progenitorowych i macierzystych do somatycznej terapii genowej.
[hasła pokrewne: badanie biochemiczne krwi, wojewódzki ośrodek medycyny pracy sosnowiec, siemie lniane jak spożywać ]
[hasła pokrewne: www checiny pl, szpital rehabilitacyjny lądek zdrój, wojewódzki ośrodek medycyny pracy sosnowiec ]