Modulacja insulinopodobnego czynnika wzrostu I wiążącego się z hodowlami jednowarstwowych ludzkich fibroblastów przez białka nośnikowe insulinopodobnego czynnika wzrostu uwalniane do pożywki inkubacyjnej.

Względny udział receptorów insulinopodobnego czynnika wzrostu (IGF) typu I i typu II oraz białek nośnikowych IGF w wiązaniu znacznika IGF-I do hodowanych ludzkich fibroblastów określono w konkurencyjnych eksperymentach wiązania, w których stosowano nieznakowaną insulinę i syntetyczną hybrydę insuliny IGF-I. cząsteczki zawierające łańcuch A insuliny i domenę B IGF-I. Podczas gdy insulina wiąże się tylko z receptorami IGF typu I, hybrydy B-IGF-I wiążą się z receptorami typu I i białkami nośnymi IGF, ale nie z receptorami typu II. W zawieszonych ludzkich fibroblastach znacznik IGF-I wiąże się głównie z receptorami typu I IGF (hamowanie przez IGF-I znacznie większe niż insulina większe niż cząsteczki hybrydowe B-IGF-I). Przeciwnie, w monowarstwach fibroblastów wiązanie IGF-I było minimalnie hamowane przez insulinę lub cząsteczki hybrydowe, co sugeruje dominujące wiązanie z receptorem IGF typu II. Read more „Modulacja insulinopodobnego czynnika wzrostu I wiążącego się z hodowlami jednowarstwowych ludzkich fibroblastów przez białka nośnikowe insulinopodobnego czynnika wzrostu uwalniane do pożywki inkubacyjnej.”

Relacja glukoneogenezy kory nerkowej, zawartość glutaminianu i produkcja amoniaku

Glutaminian jest inhibitorem glutaminaz zależnej od fosforanów (PDG), a kortykalny glutaminian nerkowy jest zmniejszony w kwasicy metabolicznej. Postulowano uprzednio, że wzrost nerkowej produkcji amoniaku z glutaminy w kwasicy metabolicznej wynika przede wszystkim z aktywacji korowego PDG w konsekwencji upadku glutaminianu. Spadek glutaminianu korowego przypisuje się zwiększeniu zdolności kory mózgowej do przekształcenia glutaminianu w glukozę w kwasicy. W niniejszym badaniu podawanie chlorku amonu szczurom w ilości nieodpowiedniej do zmniejszenia korowego glutaminianu zwiększało zdolność kory do wytwarzania amoniaku z glutaminy in vitro i zwiększonego poziomu kory mózgowej. Podobnie, kora ze szczurów zubożonych w potas miała zwiększoną zdolność do wytwarzania amoniaku i wzrost PDG, ale zawartość glutaminianu była normalna. Read more „Relacja glukoneogenezy kory nerkowej, zawartość glutaminianu i produkcja amoniaku”

Częstość pobierania glukozy za pośrednictwem nieinsuliny jest podwyższona u pacjentów z cukrzycą typu II.

Chociaż insulina ma bardzo silne działanie regulujące transport glukozy w tkankach wrażliwych na insulinę, wszystkie tkanki są zdolne do wchłaniania glukozy przez ułatwioną dyfuzję za pośrednictwem układu wychwytu glukozy za pośrednictwem nieinsuliny (NIMGU). W kilku raportach oszacowano, że w stanie poabsorpcyjnym większość usuwania glukozy zachodzi za pośrednictwem mechanizmu NIMGU. Jednak szacunki te zostały wyprowadzone lub ekstrapolowane u zdrowych ludzi. W niniejszym badaniu bezpośrednio mierzono wskaźniki NIMGU u 11 osób zdrowych (C) i 7 typu II, u których nie występowała insulina zależna od cukrzycy (NIDDM, średnia +/- na czczo stężenie glukozy w surowicy, 249 . 24 mg / dl). Read more „Częstość pobierania glukozy za pośrednictwem nieinsuliny jest podwyższona u pacjentów z cukrzycą typu II.”

Pobieranie materiałów przez nienaruszoną wątrobę. Wymiana glukozy przez błonę komórkową.

D-glukoza wyrównuje się w komórkach wątroby. Badaliśmy proces wchodzenia do tych komórek i wychodzenia z nich za pomocą techniki wielokrotnego rozcieńczania wskaźnika. Oznaczone krwinki czerwone (wskaźnik naczyniowy), znakowana sacharoza (pozakomórkowe odniesienie) i znakowana D-glukoza zostały szybko wstrzyknięte do żyły wrotnej, a z seryjnie pobieranej wątrobowej krwi żylnej otrzymano znormalizowane wzorce odpływu-czasu. Wyznakowana krzywa czerwonych komórek wzrasta do wczesnego wysokiego piku i szybko zanika; i że sacharoza osiąga późniejszy i niższy szczyt i rozpada się mniej gwałtownie, ale wytwarza równoważny obszar. Krzywa dla znakowanej D-glukozy rozpoczyna się od krzywej dla znakowanej sacharozy, stopniowo wzrasta do wartości szczytowej, która jest późniejsza i znacznie niższa niż dla sacharozy, a następnie zmniejsza się powoli. Read more „Pobieranie materiałów przez nienaruszoną wątrobę. Wymiana glukozy przez błonę komórkową.”

Proinsulina ludzkiej surowicy

Filtracja żelowa ekstraktów ludzkiej surowicy na kolumnach Bio-Gel P-30 dała dwa piki materiału reaktywnego z antysurowicą insuliny. Wcześniejsza eluowana frakcja pojawiła się w pozycji elucji proinsuliny (składnik proinsulinowy, PLC), podczas gdy druga część odpowiadała objętości elucji insulinie. W testach z użyciem świńskiej insuliny-131I i surowicy odpornościowej przeciwko insulinie świńskiej, ludzka proinsulina trzustkowa była mniej reaktywna niż insulina ludzka. Seryjne rozcieńczenia surowicy PLC w teście immunologicznym wykazały immunologiczną identyczność z ludzkim standardem proinsuliny. Częściowe tryptyczne trawienie w surowicy PLC dało produkty o zwiększonej reaktywności immunologicznej, jak oszacowano z insuliną jako standardem. Read more „Proinsulina ludzkiej surowicy”

Wyznakowane powinowactwem białko wiążące somatomedynę C / białko insulinopodobnego czynnika wzrostu z powinowactwem. Dowody na zależność od hormonu wzrostu i struktury podjednostki.

Stosując suberatian disukcynimidylu, kowalencyjnie sieciowany znakowany 125I somatomedyna-C (Sm-C) / insulinopodobny czynnik wzrostu I ulega specyficznym białkom wiążącym w ludzkim osoczu. W niefrakcjonowanych próbkach osocza od dawców prawidłowych i akromegalicznych konsekwentnie obserwowano kompleksy białek wiążących 125I-Sm-C o względnej masie cząsteczkowej (Mr) 160 000, 135 000, 110 000, 80 000, 50 000, 43 000 35 000 i 28 000 24 000. W przeciwieństwie do tego 43 000-35,000-molowych związków było często jedynymi specyficznymi kompleksami obserwowanymi w osoczu przysadki i w takich próbkach były konsekwentnie bardziej intensywnie znakowane. Redukcja próbek za pomocą beta-merkaptoetanolu nie zmieniła wzoru elektroforetycznego tych kompleksów białek wiążących 125I-Sm-C. Wszystkie białka wiążące Sm-C, z wyjątkiem kompleksu 43000-35,000-mol wag, były adsorbowane przez koniugalinę A-Sepharose. Read more „Wyznakowane powinowactwem białko wiążące somatomedynę C / białko insulinopodobnego czynnika wzrostu z powinowactwem. Dowody na zależność od hormonu wzrostu i struktury podjednostki.”

Reakcja płucna piątego komponentu myszy o wystarczającej sile dopełniacza i ułomnych myszy na hiperoksję.

Piąty składnik dopełniacza, C5, może tworzyć fragmenty, które powodują chemotaksję neutrofili, wytwarzanie rodników tlenowych i uwalnianie enzymu lizosomalnego. Celem tego badania było ustalenie, czy C5 i te fragmenty przyczyniają się do stanu zapalnego obserwowanego w toksyczności płucnej płuc, jak określono w histologii i analizie płynu z płukania oskrzelowo-pęcherzykowego (BALF). Ponadto zajęto się rolą C5 w tworzeniu śmiertelności wśród zwierząt. Pary myszy z dostateczną liczbą C5 (C5-) i C5 (C5 +), 6 miesięcy lub więcej, umieszczono w komorze i poddano prowokacji 95% tlenem pod ciśnieniem otoczenia. Po 200 godzinach ekspozycji zaobserwowano istotną różnicę śmiertelności, tj. Read more „Reakcja płucna piątego komponentu myszy o wystarczającej sile dopełniacza i ułomnych myszy na hiperoksję.”

Hipertriglicerydowe lipoproteiny o bardzo małej gęstości wywołują syntezę i akumulację trójglicerydów w makrofagach otrzewnowych myszy

Lipoproteiny bogate w triglicerydy mogą być odpowiedzialne za akumulację lipidów w makrofagach, które mogą występować w hipertriglicerydemii. Chylomikrony i lipoproteiny o bardzo niskiej gęstości (VLDL, całkowite i o stałej flotacji [Sf] 100-400) od osób z hipertriglicerydemią na czczo wywołały masową akumulację inkluzji O-dodatnich czerwieni olejowej w niestymulowanych makrofagach otrzewnowych. Nie miało to wpływu na żywotność komórek. Dominującym lipidem, który gromadził się w komórkach eksponowanych na hipertriglicerydową VLDL był trigliceryd. Hypertriglicerydowy VLDL stymulował inkorporowanie oleinianu [14C] do trójglicerydów komórkowych do dziewięciu razy w ciągu 16 godzin, ale nie do estrów cholesterolu. Read more „Hipertriglicerydowe lipoproteiny o bardzo małej gęstości wywołują syntezę i akumulację trójglicerydów w makrofagach otrzewnowych myszy”

Tworzenie poliglutaminianów metotreksatu w oczyszczonych komórkach prekursorowych mieloidalnych z prawidłowego ludzkiego szpiku kostnego.

Niedojrzałe komórki prekursorowe szpikową preferencyjnie wybrano z prawidłowego ludzkiego szpiku kostnego, stosując techniki immuno-rozetkowe, w których stosowano przeciwciała monoklonalne przeciwko dojrzałym granulocytom, monocytom, limfocytom T i B oraz prekursorom erytrocytów (odpowiednio Mo5, M3, OKT3, B1 i EP1). Badaliśmy powstawanie, retencję i działanie cytotoksyczne poliglutaminianu metotreksatu (MTX) (MTX-PG) w oczyszczonych komórkach prekursorowych mieloidalnych. Po 1- i 24-godzinnej ekspozycji na MTX, z użyciem tymidyny i deoksyinozyny jako ratunku, wewnątrzkomórkowy profil MTX-PG badano za pomocą wysokociśnieniowej chromatografii cieczowej. Wzory plamek MTX-PG badano również po dodatkowych 1-i 24-godzinnych inkubacjach w pożywkach bez leków. Cytotoksyczne działanie zatrzymanych MTX-PG na prekursorach szpikowych szpiku kostnego badano przez tworzenie kolonii na półciekłym agarze bez leku. Read more „Tworzenie poliglutaminianów metotreksatu w oczyszczonych komórkach prekursorowych mieloidalnych z prawidłowego ludzkiego szpiku kostnego.”

Dowody na powszechny, możliwy do usunięcia, mechanizm usuwania trójglicerydów z chylomikronów i lipoprotein o bardzo małej gęstości u człowieka

Osobom z hipertriglicerydemią karmiono diety, w których kalorie tłuszczu spożywczego utrzymywano na stałym poziomie, ale kalorii węglowodanów były różne. Trzech pacjentów z chylomikronemią na czczo (typ V) otrzymało mniej węglowodanów, a czterech pacjentów bez chylomikronemii na czczo (typ IV) otrzymywało diety zawierające więcej kalorii niż węglowodany. Ograniczone spożycie węglowodanów doprowadziło do zniknięcia chylomikronemii u osób, które miały chylomikronemię na normalnej diecie (typ V do IV). U osób bez chylomikronemii pojawiła się chylomikronemia w odpowiedzi na zwiększone spożycie węglowodanów (typ IV do V). Stężenie chylomikronu w osoczu uległo zmianie, mimo że przyjmowanie tłuszczu i przypuszczalnie wprowadzanie chylomikronu do osocza utrzymywało się na stałym poziomie. Read more „Dowody na powszechny, możliwy do usunięcia, mechanizm usuwania trójglicerydów z chylomikronów i lipoprotein o bardzo małej gęstości u człowieka”