Odsłonięcie procesu mikrobiologicznego mikroRNA (miRNA) procesu patofizjologicznego choroby zwyrodnieniowej stawów (OA) w chrząstce

Znalezione obrazy dla zapytania zwyrodnienie stawówMetody

Przeprowadziliśmy sekwencjonowanie RNA w 130 próbkach (n = 35 i n = 30 par odpowiednio dla informacyjnego RNA (mRNA) i miRNA) na makroskopowo zakonserwowanej i uszkodzonej chrząstce OA tego samego pacjenta i przeprowadzono analizę ekspresji różnicowej (DE) miRNA i mRNA. Aby zbudować specyficzny dla OA synomiel miRNA, zastosowano schemat priorytetyzacji oparty na odwrotnych korelacjach Pearsona i odwrotnej DE miRNA i mRNA. Następnie zostały one przefiltrowane przez te obecne w przewidywanych (TargetScan / microT-CDS) i / lub sprawdzonych eksperymentalnie (miRTarBase / TarBase) publicznych bazach danych. Przeprowadzono analizę wzbogacania szlaku w celu wyjaśnienia szlaków związanych z OA, w których pośredniczyły mechanizmy regulujące miRNA.

Wyniki

Stwierdzono różnicę ekspresji 142 miRNA i 2387 mRNA między uszkodzoną i zachowaną chrząstką stawową OA. Po zastosowaniu priorytetów w kierunku prawdopodobnych celów miRNA-mRNA, stworzono sieć regulacyjną 62 miRNA nakierowanych na 238 mRNA. Późniejsza analiza wzbogacania tych mRNA (lub genów) wyjaśniła, że ​​w genach w obrębie „rozwoju układu nerwowego” prawdopodobnie pośredniczą mechanizmy regulacji miRNA (błąd rodzinny = 8,4 × 10-5). Tutaj NTF3 koduje neurotrofinę-3, która kontroluje przeżycie i różnicowanie neuronów i jest ściśle związana z czynnikiem wzrostu nerwów.

Wnioski

Dzięki zintegrowanemu podejściu do miRNA i danych dotyczących sekwencjonowania mRNA chrząstki OA, wyjaśniono interakcje miRNA z miRNA i pokrewne szlaki. Nasze dane funkcjonalne wykazały poziomy interakcji, przy których miRNA wpływa na ekspresję genów w chrząstce i ilustruje złożoność funkcjonalnego sprawdzania poprawności sieci genów, które mogą być celem wielu miRNA.
[patrz też: triathlon dąbrowa górnicza, ćwiczenia na spostrzegawczość, ścięgno achillesa rehabilitacja ]

Zmniejszona aktywność termo-labilna opsoniczna i poziomy dopełnienia związane z dowodami na produkty rozkładu C3 w zakażonych opłucnach opłucnych

Aktywność opsoniczną termicznie mierzono jednocześnie w surowicy i płynie opłucnowym pacjentów z przesięczkami, wysiękami zakaźnymi (z pozytywną lub negatywną hodowlą bakteryjną) i wysiękami nowotworowymi, stosując dwa różne testy fagocytujące zależne od dopełniacza: zabijanie szczepu wariantowego Staphylococcus aureus Wood 46 (Miana opsoniczne K50) i ocena szybkości przyjmowania cząstek parafiny pokrytych endotoksyną (test absorpcji Oil Red 0). Miano opsoniczne K50 było niższe w wysięku opłucnowym dodatnim dla kultury, w porównaniu do wysięku z hodowli (P <0,002) lub wysięku nowotworowego (P <0,002). Wyniki te zostały potwierdzone testem wychwytu Oil Red 0. Dane uzyskane w dwóch testach wykazały istotną korelację (P <0,001). Aktywność hemolityczną dopełniacza (CH50), jak również poziomy produktu rozkładu C3d, mierzono w tych samych próbkach surowicy i płynu opłucnowego oraz w dodatkowej grupie pacjentów z wysiękiem opłucnej o tej samej etiologii. Read more „Zmniejszona aktywność termo-labilna opsoniczna i poziomy dopełnienia związane z dowodami na produkty rozkładu C3 w zakażonych opłucnach opłucnych”

Chlorochina indukuje zabijanie Histoplasma capsulatum przez ludzkie makrofagi, ograniczając dostępność wewnątrzkomórkowego żelaza i jest terapeutyczna w mysim modelu histoplazmozy.

Badaliśmy rolę żelaza wewnątrzkomórkowego w zdolności drożdży Histoplasma capsulatum (Hc) do namnażania się w ludzkich makrofagach (Mphi). Kokultura Mphi zakażonego Hc z deferoksaminą żelaza chelatora hamowała wzrost drożdży w sposób zależny od stężenia. Wpływ deferoksaminy został odwrócony przez nasyconą żelazem transferynę (holotransferyna), ale nie przez transferynę wolną od żelaza (apotransferrynę). Chlorochina, która zapobiega uwalnianiu żelaza z transferyny przez podwyższenie pH endocytowego i lizosomalnego, indukowała ludzki Mphi zabijając Hc. Efekt chlorochinonu został odwrócony przez nitrylooctan żelaza, związek żelaza, który jest rozpuszczalny w obojętnym do zasadowego pH, ale nie przez holotransferynę, która uwalnia żelazo tylko w kwaśnym środowisku. Read more „Chlorochina indukuje zabijanie Histoplasma capsulatum przez ludzkie makrofagi, ograniczając dostępność wewnątrzkomórkowego żelaza i jest terapeutyczna w mysim modelu histoplazmozy.”

Wpływ ćwiczeń na przepływ limfy w płucach u owiec i kóz podczas normoksji i niedotlenienia.

Energiczne ćwiczenia powodują znaczny wzrost pojemności minutowej serca przy minimalnym wzroście mierzalnego ciśnienia w naczyniach płucnych. Te zmiany w hemodynamice płucnej powinny wpływać na wodę płucną i ruch solutowy. Dziewięciokrotnie mierzyliśmy wpływ ćwiczeń normoksycznych na przepływ limfy w płucach u czterech owiec i dwóch kóz z przewlekłymi przetokami limfatycznymi (wt = 15-25 kg). Ponadto przepływ limfy mierzono również pięciokrotnie u owiec podczas ćwiczeń przy zmniejszonych ciśnieniach barometrycznych (430 i 380 mmHg). W normobarii zwierzęta pobiegały z prędkością 3-5 km / h, z 0-10% wzniesieniem bieżni przez 15 do 85 minut. Read more „Wpływ ćwiczeń na przepływ limfy w płucach u owiec i kóz podczas normoksji i niedotlenienia.”

Degradacja plazmy usieciowanej fibryny: CHARAKTERYSTYKA NOWYCH KOMPLEKSÓW ROZPUSZCZALNYCH MACROMOLEKULARNYCH ORAZ MODELU ICH STRUKTURY

Usieciowana fibryna została strawiona plazminą i trzy rozpuszczalne kompleksy większe niż DD / E zostały oczyszczone i scharakteryzowane. Po chromatografii żelowej, oczyszczone kompleksy wykazały masy cząsteczkowe 465,000, 703,000 i 850,000, określone przez sedymentację równowagową. Każdy z kompleksów został zdysocjowany na dwa lub więcej fragmentów za pomocą elektroforezy w żelu poliakryloamidowym z SDS. Strukturę tych fragmentów podjednostek ustalono na podstawie oznaczeń ich masy cząsteczkowej i składu łańcucha polipeptydowego oraz ze znanych miejsc cięcia fibryny przez plazmina. Fragmenty większe niż DD zostały zidentyfikowane, że zawierają nienaruszone. Read more „Degradacja plazmy usieciowanej fibryny: CHARAKTERYSTYKA NOWYCH KOMPLEKSÓW ROZPUSZCZALNYCH MACROMOLEKULARNYCH ORAZ MODELU ICH STRUKTURY”

Rozbieżne mechanizmy opornego na insulinę i nadreaktywnego transportu glukozy w komórkach tłuszczowych szczurów głodzonych i poddanych terapii. Zmiany w liczbie transporterów glukozy i aktywności wewnętrznej.

Wpływ postu i ponownego podawania na odpowiedź transportową glukozy na insulinę w izolowanych szczurzych komórkach tłuszczowych zbadano przy użyciu transportu 3-O-metyloglukozy w nienaruszonych komórkach i wiązaniu cytochalazyny B i Western blotting w subkomórkowych frakcjach błony. Po 72-godzinnym głodzeniu podstawowa aktywność transportowa glukozy zmniejsza się nieznacznie, a stymulowana insuliną aktywność zmniejsza się o ponad 85%. Po 48 godzinach głodzenia stymulowana insuliną aktywność transportu glukozy zmniejsza się z 3,9 +/- 0,5 do 1,3 +/- 0,3 fmola / komórkę na minutę (średnia +/- SEM). Podobnie, stężenia transporterów glukozy zmniejszają się z postem w obu błonach plazmatycznych od stymulowanych insuliną komórek od 38 +/- 5 do 18 +/- 3 pmol / mg białka błonowego i mikrosomów o niskiej gęstości z komórek podstawnych od 68 + / – 8 do 34 +/- 9 pmol / mg białka błonowego. Ad lib. Read more „Rozbieżne mechanizmy opornego na insulinę i nadreaktywnego transportu glukozy w komórkach tłuszczowych szczurów głodzonych i poddanych terapii. Zmiany w liczbie transporterów glukozy i aktywności wewnętrznej.”

Wpływ podstawowej insuliny i wydzielania glukagonu na metabolizm potasu i sodu: BADANIA Z SOMATOSTATYNĄ W NORMALNYCH PSÓW I W NORMALNYCH I CUKRZYCOWYCH LUDZKICH LUDZKACH

W celu zbadania roli podstawowej insuliny i wydzielania glukagonu w homeostazie potasu i sodu, somatostatyna, silny inhibitor insuliny i wydzielania glukagonu była podawana w infuzji przez 5 godzin zdrowym ludziom, cukrzycy o dojrzałości, młodocianych cukrzycach i normalnych psach. . Infuzja somatostatyny spowodowała zwiększenie stężenia potasu w surowicy (0,5-0,6 meq / litr) u zdrowych osób i cukrzycy o dojrzałości, ale nie u osób z cukrzycą typu młodzieńczego pomimo równoważnego zmniejszenia stężenia glukagonu w osoczu we wszystkich trzech grupach. Podobny wzrost stężenia potasu w surowicy obserwowano u normalnych, świadomych psów, którym podawano somatostatynę, i został on odwrócony przez zastąpienie insuliny. Na somatostatynę nie wpływało moczowe wydalanie potasu. Read more „Wpływ podstawowej insuliny i wydzielania glukagonu na metabolizm potasu i sodu: BADANIA Z SOMATOSTATYNĄ W NORMALNYCH PSÓW I W NORMALNYCH I CUKRZYCOWYCH LUDZKICH LUDZKACH”

Indukcja lipoprotein plazmatycznych i hamowanie wytwarzania komórek prokoagulacyjnych w Vitro: WYMOGI DLA WSPÓŁPRACY KOMÓRKOWEJ

Izolowane ludzkie osocze o niskiej gęstości, gęstości pośredniej i lipoproteinach o dużej gęstości w stężeniach fizjologicznych wykazano w poprzednim raporcie, aby indukować znaczący wzrost aktywności prokoagulacyjnej ludzkich jednojądrzastych komórek krwi obwodowej in vitro, podczas gdy lipoproteina o niskiej gęstości nie była. Monocyt został zidentyfikowany w tym badaniu przez frakcjonowanie komórkowe i bezpośrednie testy cytologiczne jako źródło tej indukowalnej aktywności, identyfikując w ten sposób aktywność prokoagulacyjną jako monokinę. Generowanie tych indukowanych lipoproteinami prokoagulacyjnych monokin było całkowicie zależne od obecności limfocytów. Izolowane limfocyty, które zostały wystawione na stymulujące lipoproteiny, mogą indukować monocyty do wytwarzania aktywności prokoagulacyjnej, podczas gdy ani medium hodowlane z limfocytów stymulowanych lipoproteinami, ani homogenaty limfocytów, ani inne komórki, takie jak płytki krwi, nie mogą zastąpić tego wymogu. Interakcja stymulujących lipoprotein z limfocytami była szybka, osiągając zakończenie w ciągu 30 minut i była równie skuteczna w 4 ° lub 37 ° C. Read more „Indukcja lipoprotein plazmatycznych i hamowanie wytwarzania komórek prokoagulacyjnych w Vitro: WYMOGI DLA WSPÓŁPRACY KOMÓRKOWEJ”

Nitrogliceryna stymuluje syntezę prostacykliny przez hodowane ludzkie komórki śródbłonka

Nitrogliceryna (NTG), środek najczęściej stosowany w leczeniu ostrej dławicy piersiowej, jest lekiem rozszerzającym naczynia krwionośne, którego mechanizm działania pozostaje nieznany. Postawiliśmy hipotezę, że NTG może indukować komórki śródbłonka do syntezy prostacykliny (PGI2), znanego środka rozszerzającego naczynia krwionośne i inhibitora agregacji płytek krwi. Dlatego hodowane ludzkie komórki śródbłonka inkubowano z NTG w różnych stężeniach przez 1-3 min. Aktywność biologiczną PGI2 w supernatantach komórek śródbłonka badano przez hamowanie agregacji płytek krwi in vitro. Stężenie 6-keto-PGF1a, stabilnego produktu hydrolizy PGI2, zmierzono za pomocą specyficznego testu radioimmunologicznego. Read more „Nitrogliceryna stymuluje syntezę prostacykliny przez hodowane ludzkie komórki śródbłonka”

Mechanizm Tłumienia Wazopresyny podczas stymulacji alfa-adrenergicznej za pomocą noradrenaliny

Ostatnie badania wykazały, że diureza wodna związana z dożylnym wlewem norepinefryny jest pośrednio związana z supresją uwalniania hormonu antydiuretycznego (ADH). Aby zbadać, czy wzrost ciśnienia perfuzji mózgowej za pomocą dożylnej noradrenaliny (0,5 .g / kg / min) jest bezpośrednio odpowiedzialny za zahamowanie uwalniania ADH, obieg tętnic szyjnych u psów został obustronnie perfundowany pompą, aby selektywnie zwiększyć ciśnienie perfuzji mózgowej. W sześciu doświadczeniach ciśnienie perfuzji mózgowej zwiększono ze średniej o 125 do 151 mm Hg, a następnie z powrotem do 120 mm Hg. Ten manewr nie wiązał się z odwracalnym wzrostem wydalania nerkowego. Zbadano również, czy norepinefryna wywiera bezpośredni centralny efekt w celu powstrzymania uwalniania ADH. Read more „Mechanizm Tłumienia Wazopresyny podczas stymulacji alfa-adrenergicznej za pomocą noradrenaliny”