Selektywna ekspresja nadaktywności syntetazy fosforoibosilofosforanowej w ludzkich liniach limfoblastycznych.

Fenotypową ekspresję superpochodności syntetazy 1-pirofosforanu 5-fosfibibozylu (PRPP) badano w liniach limfoblastów pochodzących od sześciu niepowiązanych pacjentów płci męskiej. Fibroblasty tych osobników mają zwiększone tempo syntezy PRPP i nukleotydu purynowego i wyrażają cztery klasy zaburzeń kinetycznych leżących u podstaw superwatywności enzymów: zwiększoną maksymalną prędkość reakcji (katalityczny defekt); oporność na inhibitor (defekt regulacyjny); zwiększone powinowactwo substratu (wada wiązania substratu); oraz połączone wady katalityczne i regulacyjne. Linie limfoblastów od trzech pacjentów z defektami katalitycznymi i od trzech zdrowych osób były nieodróżnialne pod względem aktywności enzymów, stężeń i generacji PRPP oraz tempa syntezy puryn. Enzym w limfoblastach od pacjenta z połączonymi defektami wykazywał również normalną maksymalną prędkość reakcji, ale wyrażał oporność na inhibitor nukleotydu purynowego. Drugi defekt regulacyjny i defekt wiązania substratu były również widoczne w limfoblastach i były identyczne z defektami enzymu w fibroblastach od odpowiednich pacjentów. Read more „Selektywna ekspresja nadaktywności syntetazy fosforoibosilofosforanowej w ludzkich liniach limfoblastycznych.”

Dynamika wewnątrznerowa w patogenezie i zapobieganiu ostrej nefropatii moczanowej.

Rurkowy przepływ płynu, osmolalność moczu i pH zostały selektywnie zmienione w celu określenia względnej roli ochronnej tych czynników w szczurzym modelu ostrej nefrofatii moczanowej. W pięciu grupach zwierząt ustalono różne warunki moczowodu urazowego: (a) normopeniczne szczury Wistar nie poddane wstępnej obróbce (grupa I); (b) szczury Wistar, którym podawano acetazolamid, 20 mg / kg, i izotoniczny NaHCO3 w celu wytworzenia alkalizacji moczu (Grupa II); (c) szczury rasy Wistar, u których umiarkowaną diurezę, podobną do obserwowanej w grupie II, ale bez alkalizacji moczu, wywołano furosemidem, 2 mg / kg (grupa III); (d) szczury Wistar, w których diureza o wysokim natężeniu przepływu została wywołana furosemidem, 15 mg / kg (grupa IV); (e) szczury Brattleboro, homozygotyczne pod względem moczówki prostej przysadki mózgowej, które miały spontaniczną diurezę wody o wysokim przepływie (Grupa V). Porównywalny poziom hiperurykemii (19,4 +/- 2,2 mg / 100 ml) osiągnięto u wszystkich zwierząt z wlewem dożylnym z moczem. Badania czystości i mikropunktury wykonano przed i godzinę po indukcji hiperukemii. Szczury z grupy I miały średni spadek przepływu w nerkach w osoczu i filtrację kłębuszkową, odpowiednio, 83 i 86%; Szybkość filtracji nefronu zmniejszyła się o 66%, a ciśnienie w rurkach i mikronaczyniach zwiększyło się dwukrotnie. Read more „Dynamika wewnątrznerowa w patogenezie i zapobieganiu ostrej nefropatii moczanowej.”

Oddzielenie subletalnych i letalnych efektów białka zwiększającego bakteriobójczość / przepuszczalność na Escherichia coli.

Wiązanie się białka bakteriobójczego / zwiększającego przepuszczalność (BPI) granulocytów z Escherichia coli szybko powoduje kilka dyskretnych zmian zewnętrznej powłoki i zatrzymania wzrostu bez znacznego upośledzenia struktury bakteryjnej lub zdolności biosyntezy, podnosząc kwestię, czy te wczesne efekty BPI są wystarczające do wywołania bakterii. śmierć. W tym badaniu badano działanie bakteriobójcze BPI. Stwierdziliśmy, że albumina z surowicy bydlęcej lub ludzkiej blokuje zabijanie bakterii bez zapobiegania wiązaniu BPI lub wzrostu przepuszczalności błony zewnętrznej. Ponadto dodanie albuminy surowicy po BPI powoduje wznowienie wzrostu bez przesunięcia związanego BPI i bez (wczesnej) naprawy zmian w obwiedni. Read more „Oddzielenie subletalnych i letalnych efektów białka zwiększającego bakteriobójczość / przepuszczalność na Escherichia coli.”

Korelacja pomiędzy wentylacją a przepływem krwi w mózgu podczas snu.

Związki pomiędzy przepływem krwi w mózgu (BBF) a wentylacją (VI) badano podczas snu u 13 kóz. Jednostronne BBF mierzono w sposób ciągły za pomocą elektromagnetycznej sondy przepływowej; całkowita i regionalna BBF została oceniona techniką mikrosfery promieniotwórczej u czterech zwierząt. Oddziaływanie zmian w VI i BBF miało miejsce podczas snu wolnej fali (SWS) i snu szybkiego ruchu gałek ocznych (REM). Podczas SWS wystąpił znaczny spadek VI i wzrost tętniczego PCO2 w porównaniu do czuwania. BBF podczas SWS korelował liniowo z ciśnieniem tętniczym CO2 (PaCO2); I związek był podobny do tego dla obudzonych kóz oddychających CO2. Read more „Korelacja pomiędzy wentylacją a przepływem krwi w mózgu podczas snu.”

Aktywacja peptydem chemotaktycznym ludzkich neutrofili i komórek HL-60. Toksynę krztuścową ujawnia korelację między wytwarzaniem trisfosforanu inozytolu, przejściami jonów wapnia i aktywacją komórkową.

Mechanizm aktywacji neutrofili przez peptyd chemotaktyczny formyl-metionyl-leucylo-fenyloalaninę (FMLP) badano przez wstępne traktowanie ludzkich neutrofili toksyną krztuśca. Po stymulacji FMLP, stężenie wapnia wolnego od cytozolów, [Ca2 +] i, zwiększa się zarówno przez stymulację dopływu wapnia, jak i mobilizację wapnia komórkowego. Mierzono [Ca2 +] i, jak również wytwarzanie produktu rozpadu fosfolipidów, trisfosforanu inozytolu (IP3), który, jak się uważa, pośredniczy w mobilizacji Ca2 +. Jako że pula fosfoinozytolitu w ludzkich neutrofilach jest trudna do wstępnego znakowania [3H] mioinozytolem, eksperymenty przeprowadzono również w hodowli komórkowej ludzkiej białaczki promielocytowej HL-60 po różnicowaniu z dimetylosulfotlenkiem. Wstępne traktowanie toksyny krztuścowej obu typów komórek hamowało stymulowaną przez FMLP depolaryzację błony, egzocytozę i produkcję ponadtlenku w sposób zależny od dawki. Read more „Aktywacja peptydem chemotaktycznym ludzkich neutrofili i komórek HL-60. Toksynę krztuścową ujawnia korelację między wytwarzaniem trisfosforanu inozytolu, przejściami jonów wapnia i aktywacją komórkową.”

Zmiany klirensu metabolicznego wazopresyny i wazopresyazy z osocza podczas ciąży u ludzi.

Współczynniki klirensu metabolicznego (MCR) wazopresyny argininowej (AVP) mierzono seryjnie u pięciu kobiet rozpoczynających się przed poczęciem, w tygodniach ciąży 7-8 (wcześnie), 22-24 (w środku) i 36-38 (późna ciąża) i ponownie 10-12 tygodni po porodzie. Częstotliwości usuwania hormonów określono po obciążeniu wodą, aby zahamować endogenne uwalnianie AVP, stosując stałą metodę infuzji zaprojektowaną do osiągnięcia trzech różnych stężeń AVP w osoczu (PAVP) w stanie stacjonarnym przy każdej okazji testowej. Harmonogramy dawek zmieniały się w połowie i pod koniec ciąży, aby uzyskać porównywalne poziomy AVP na każdym etapie protokołu. Wstępne nawodnienie zmniejszyło osmolalność osocza w stopniu wystarczającym do zahamowania uwalniania AVP, ponieważ cyrkulująca neuropsysyna AVP mierzona seryjnie u trzech kobiet była niewykrywalna. MCR AVP był podobny przed poczęciem (0,75 +/- 0,31, 0,79 +/- 0,34 i 0,76 +/- 0,28 litrów / min w PAVP 2,6 +/- 1,9, 4,7 +/- 2,4 i 8,3 +/- 3,9 pg / ml) we wczesnej ciąży (0,89 +/- 0,34, 0,97 +/- 0,04 i 0,95 +/- 0,40 litrów / min w PAVP 2,2 +/- 2,1, 3,9 +/- 3,2 i 7,9 + / – 3,4 pg / ml) i po porodzie (0,70 +/- 0,21, 0,69 +/- 0,24 i 0,75 +/- 0,20 litrów / min w PAVP 3,5 +/- 1,8, 5,1 +/- 3,7 i 9,1 +/- 4,2 pg / ml). Read more „Zmiany klirensu metabolicznego wazopresyny i wazopresyazy z osocza podczas ciąży u ludzi.”

Porównanie wpływu bodźców rozszerzających naczynia na naczynia oporności obwodowej u osób zdrowych oraz u pacjentów z zastoinową niewydolnością serca

Celem tego badania było scharakteryzowanie mechanizmu skurczu naczyń obwodowych obserwowanego w niewydolności serca i ustalenie, czy można go przypisać zwiększonej sympatycznej aktywności nerwowej, charakterystycznej dla tego stanu. Reakcja łóżka oporowego w przedramieniu po zwolnieniu okluzji napływowej (przekrwienie reakcyjne), na wysiłek fizyczny i na miejscowe ogrzewanie oraz odpowiedź naczyń opornych na cielę na zatkanie tętnic i dotętniczy azotyn sodu i fentolaminę badano w 23 pacjentów z zastoinową niewydolnością serca i 21 zdrowych osób. U osób zdrowych reaktywne przekrwienie przepływu krwi po różnych okresach okluzji tętnic znacznie przekroczyło wartości obserwowane u pacjentów z niewydolnością serca. Miejscowa blokada znieczulenia i dotętnicza fentolamina nie zmieniły istotnie reaktywnej odpowiedzi przekrwienia u pacjentów z niewydolnością serca, milcząc przeciwko możliwości, że zwiększona współczulna aktywność zwężania naczyń jest odpowiedzialna za zmniejszenie tej odpowiedzi. Po kompensacji reaktywne przekrwienie odpowiedzi powróciło do normy. Read more „Porównanie wpływu bodźców rozszerzających naczynia na naczynia oporności obwodowej u osób zdrowych oraz u pacjentów z zastoinową niewydolnością serca”

Oddzielenie subletalnych i letalnych skutków leukocytów polimorfojądrowych na Escherichia coli.

Escherichia coli spożyte przez PMN szybko przestają rosnąć i nie tworzą kolonii na agarze odżywczym, ale metabolizują w pobliżu normalnie przez kilka godzin. Bakteriobójcze / zwiększające przepuszczalność białko (BPI) PMN hamuje również wzrost E. coli bez początkowych zaburzeń metabolicznych. Niedawno wykazaliśmy, że E. coli traktowane przez BPI, chociaż nie mogą rosnąć w normalnym agarze odżywczym, może tworzyć kolonie w tym medium plus 0,1% BSA, o ile utrzymują się ich metabolizm, co wskazuje, że upośledzenie biochemiczne jest lepszym wskaźnikiem śmierci niż zahamowanie wzrostu (1990. Read more „Oddzielenie subletalnych i letalnych skutków leukocytów polimorfojądrowych na Escherichia coli.”

Przewlekłe limfocyty białaczkowe Brak obecności makrocząsteczek zimnej globuliny w ilości 185,000 Daltonów na normalnych limfocytach B

Ostatnio scharakteryzowaliśmy dwa białka błonowe związane z limfocytami, które zostały nazwane 225000-daltonową i 185000-daltonową nierozpuszczalną zimą globuliną (odpowiednio 225-MICG i 185-MICG) w celu rozróżnienia ich głównych właściwości fizykochemicznych. Białka te różnią się pod względem antygenowym, strukturalnym i rozmieszczeniem komórkowym. Komórki T można odróżnić przez syntezę i obecność w błonie plazmatycznej 225-MICG, komórek Null przez pojawienie się 185-MICG i komórek B przez pojawienie się 225- i 185-MICG. Charakterystyka tych dwóch białek w monoklonalnych limfocytach B przewlekłej białaczki limfatycznej stanowi podstawę tego raportu. Korzystając z mikroskopii immunofluorescencyjnej, znaleźliśmy tylko 225-MICG na powierzchni przewlekłej białaczki limfocytowej (CLL) u 15 pacjentów, podczas gdy kontrolne komórki B z 20 osobników wykazywały zarówno 225- jak i 185-MICG. Read more „Przewlekłe limfocyty białaczkowe Brak obecności makrocząsteczek zimnej globuliny w ilości 185,000 Daltonów na normalnych limfocytach B”

Transport taurocholanu sprzężony z sodem w proksymalnej konwolucji nerki szczura w Vivo i In Vitro

Stosując technikę stojącej kropelki w zwężeniu proksymalnym nerki i równoczesną mikroperforację kapilar okołooczodołowych, określono różnicę stężenia pierścienia zerowego strumienia netto taurocholanu (a CTCa) po 45 s jako miarę reabsorpcji aktywnej kwasu żółciowego in vivo. Zaczynając od 0,1 mmol / litr taurocholanu w obu perfuzatach kontrolnego a CTC. 0,042 mmol / litr spadło do 0,006 mmol / litr (P <0,001), gdy stężenie Na + w perfuzatach zmniejszono do zera. Usunięcie wodorowęglanu z perfuzatów w celu zmiany pH nie miało wpływu na. CTC .. Read more „Transport taurocholanu sprzężony z sodem w proksymalnej konwolucji nerki szczura w Vivo i In Vitro”